درک نکات پیپت کم اتصال

1. نکات پیپت اتصال کم چیست؟

نکات پیپت کم اتصال مواد مصرفی آزمایشگاهی برای پیپترها (پیپت ها) طراحی شده اند که دارای درمان های خاص سطح هستند و/یا از مواد خاص ساخته شده اند. هدف اصلی طراحی آنها این است که به طور قابل توجهی جذب و احتباس نمونه را روی دیواره داخلی نوک کاهش می دهد .

• مشکل اصلی: نکات پلی پروپیلن استاندارد دارای سطحی با آبگریز و بار ذاتی است که می تواند منجر به جذب غیر اختصاصی اجزای نمونه خاص ، به ویژه زیست مولکولهای (مانند پروتئین ها ، اسیدهای نوکلئیک) و محلول های چسبناک شود.
• راه حل: نکات اتصال کم ، خواص سطح دیواره داخلی را از طریق روشهای فیزیکی یا شیمیایی تغییر می دهد و آن را آبگریز تر و بی اثر تر می کند و از این طریق نیروهای تعامل بین مولکول ها و دیواره نوک را کاهش می دهد.

2. نحوه کار آنها (فن آوری های تصفیه سطح)

اثر اتصال کم در درجه اول از طریق فن آوری های زیر حاصل می شود:

• مواد افزودنی ویژه پلیمری: ترکیب مواد افزودنی پلیمری خاص (به عنوان مثال ، اصلاح کننده های آبگریز) در مواد پایه پلی پروپیلن در حین تولید ، به بدن نوک به خواص کم اتصال ذاتی می دهد. این جریان جریان فعلی و پایدار ترین روش است.
• پوشش های سطح:
  • پوشش های آبگریز: استفاده از یک روکش آبگریز (به عنوان مثال ، پوشش های پلیمری خاص) به دیواره داخلی برای افزایش مرطوب شدن سطح ، کاهش احتباس مایع و جذب پروتئین.
  • پوشش های بی اثر: استفاده از پوشش های بسیار بی اثر (به عنوان مثال ، برخی از مشتقات سیلان) برای کاهش سایت های فعال سطح و به حداقل رساندن جذب شیمیایی.
• درمان های خاص سطح: تغییر ریزساختار و خصوصیات شیمیایی سطح پلی پروپیلن از طریق روشهای فیزیکی (به عنوان مثال ، درمان پلاسما) یا اچ شیمیایی برای افزایش آبگریز.
• پلی پروپیلن خلوص فوق العاده بلند: استفاده از مواد اولیه پلی پروپیلن با محتوای ناخالصی بسیار کم برای کاهش مکان های جذب احتمالی ناشی از ناخالصی ها.

3. مزایا و ویژگی های کلیدی

• از دست دادن نمونه به حداقل می رسد: این مزیت اصلی است. به طور قابل توجهی جذب و احتباس نمونه های گرانبها ، کم غلظت یا دقیقه (به عنوان مثال ، پروتئین ، DNA ، RNA ، آنزیم ها ، آنتی بادی ها ، معرفهای چسبناک) را بر روی دیواره نوک کاهش می دهد و از پیپت استفاده می کند. دقت وت بهبودی .
• دقت و تکرارپذیری تجربی را بهبود می بخشد: کاهش جذب به معنای حجم توزیع مداوم تر ، کاهش خطاهای تجربی ناشی از حمل نمونه و افزایش نتیجه است قابلیت اطمینان وت قابلیت تولید مثل .
• خطر آلودگی متقابل را کاهش می دهد: اخراج مایع کامل تر و باقیمانده نمونه کمتر خطر آلودگی متقابل را هنگام پی در پی نمونه های مختلف کاهش می دهد.
• ایده آل برای برنامه های حساس: تأثیر را بر فعالیت نمونه به حداقل می رساند ، و آنها را به ویژه برای آزمایش های حساس به جذب در زیست شناسی مولکولی ، زیست شناسی سلولی ، پروتئومیکس ، تشخیص و غیره مناسب می کند.
• قابلیت مرطوب شدن را بهبود می بخشد: به طور معمول آبگریز بهتر را نشان می دهد و به مایع اجازه می دهد تا به راحتی در نوک جریان یابد و باعث کاهش پایبندی منیسک و تشکیل حباب شود و منجر به عملکرد لوله کشی نرم تر شود.

4. برنامه های کلیدی (کدام آزمایشات به خصوص به آنها احتیاج دارند؟)

نکات اتصال کم برای برنامه های زیر بسیار توصیه می شود ، تقریباً ضروری است:

• زیست شناسی مولکولی:
  • با توان بالا PCR ، qPCR ، DDPCR: از بین رفتن DNA/الگو ، اطمینان از راندمان تقویت و دقت کمیت را کاهش می دهد.
  • تصفیه اسید نوکلئیک و تهیه کتابخانه: از از بین رفتن قطعات گرانبها DNA/RNA در هنگام تصفیه جلوگیری می کند.
  • تهیه نمونه NGS: پیپتینگ دقیق کتابخانه های دقیقه بسیار مهم است.
• تحقیقات پروتئین:
  • سنجش غلظت پروتئین (BCA ، بردفورد و غیره): از جذب پروتئین جلوگیری می کند که منجر به دست کم گرفتن غلظت می شود.
  • سنجش فعالیت آنزیم/سینتیک: مقدار دقیق آنزیم را تضمین می کند و از از دست دادن فعالیت جلوگیری می کند.
  • آماده سازی نمونه وسترن بلات: پیپتینگ دقیق پروتئین ها در بافرهای حاوی SD یا کاهش دهنده مواد.
  • تصفیه پروتئین (به عنوان مثال ، جمع آوری کسر کروماتوگرافی میل): از از بین رفتن پروتئین هدف جلوگیری می کند.
• کشت سلولی و آزمایش های مرتبط:
  • عبور/آبکاری رده های سلولی گرانبها یا سلولهای اولیه: کاهش چسبندگی سلول در نوک را کاهش می دهد.
  • سنجش زنده ماندن سلولی: پیپتینگ دقیق سیستم تعلیق سلول و معرفها.
  • ترانسفکشن: پیپتینگ دقیق DNA ، RNA ، مجتمع های معرف ترانسفکشن.
• تشخیص و آزمایش بالینی: ELISA ، Immunoassays Chemiluminescent ، Poct: نمونه دقیق و حجم معرف را تضمین می کند ، باعث بهبود حساسیت و دقت تشخیص می شود.
• راه حل های چسبناک یا مستعد فوم: گلیسرول ، DMSO ، راه حل های سورفاکتانت ، بافرهای خاص: باعث کاهش احتباس و حمل ، بهبود دقت پیپت می شود.
• هر آزمایشی شامل نمونه های گرانبها ، دقیقه ای یا نیاز به دقت و تکرارپذیری بالا.

5. چگونه نوک پیپت اتصال کم راست را انتخاب کنیم؟

• سازگاری: شرط اصلی این است که آنها باید کاملاً با برند و مدل پیپت خود سازگار باشید. همیشه لیست های سازگاری را تأیید کنید یا قبل از خرید با راهنمای سازنده مشورت کنید.
• گواهینامه ها و کیفیت:
  • مجوز RNase/DNase/بدون پیروژن: برای زیست شناسی مولکولی و آزمایش های کشت سلولی بسیار مهم است. از صدور گواهینامه معتبر اطمینان حاصل کنید.
  • بدون مهار کننده PCR بدون مهار: برای برنامه های PCR/qPCR بسیار مهم است.
  • کیفیت تولید: تولید با کیفیت بالا ابعاد دقیق ، شکل سازگار ، عدم وجود برآمدگی ها و عدم آلودگی ذرات (درجه پاکیزگی) را تضمین می کند. مارک های معتبر را انتخاب کنید.
• سطح عملکرد کم اتصال: عملکرد می تواند بین مارک ها و سری ها متفاوت باشد. به داده های عملکرد ارائه شده توسط تولید کننده توجه کنید (به عنوان مثال ، گزارش های آزمایش باقیمانده جذب پروتئین). برای کاربردهای بسیار خواستار (به عنوان مثال ، توالی تک سلولی ، تشخیص پروتئین فراوانی فوق العاده کم) ، نکات اتصال کم سطح بالا ممکن است لازم باشد.
• بسته بندی و استریل:
  • قالب بسته بندی: Racked (انباشته یا فله) ، کیسه ای ، فیلتر شده (اختیاری). بسته بندی متناسب با گردش کار و اتوماسیون خود را انتخاب کنید.
  • نکات فیلتر شده: در صورت نیاز به آلودگی آئروسل در شافت پیپت ، نکات اتصال کم را با فیلترها انتخاب کنید (نکات فیلتر کم اتصال). خود فیلتر نیز باید اتصال کم داشته باشد.
  • پیش از استریل: بیشتر آزمایشات به نکات قبل از استریل (به طور معمول گاما تابش شده) نیاز دارند. روش عقیم سازی و سطح تضمین استریل (SAL) را تأیید کنید. نکات غیر استریل برای برخی از برنامه های غیر بحرانی مناسب است یا اینکه آزمایشگاه استریل سازی خاص خود را انجام می دهد.
• مقرون به صرفه بودن: نکات کم اتصال به طور کلی گران تر از نکات استاندارد است. ارزیابی مقرون به صرفه بودن ضمن برآورده کردن نیازهای عملکرد. با استفاده از نکات استاندارد برای صرفه جویی در هزینه ها ، در مورد آزمایش های مهم سازش نکنید ، زیرا داده های نادرست یا از دست دادن نمونه می تواند منجر به زباله های بیشتر شود.

6. یادداشت های استفاده

• پیوست مناسب: اطمینان حاصل کنید که نوک به طور ایمن و به طور محکم به پیپت و بدون شکاف وصل شده است تا از نشت هوا و حجم نادرست جلوگیری شود.
• قبل از مرطوب کردن: برای مایعات چسبناک یا بی ثبات ، قبل از خیس شدن (آسپیراسیون و توزیع مایع چند بار قبل از انتقال واقعی) گاهی اوقات می تواند دقت بیشتری را بهبود بخشد (حتی با نکات کم اتصال). دستورالعمل های عملیاتی پیپت را دنبال کنید.
• از پایان دادن به نوک نوک خودداری کنید: استریل را حفظ کرده و از آلودگی جلوگیری کنید.
• ذخیره سازی: در یک مکان خنک و خشک به دور از نور مستقیم خورشید و گرد و غبار ذخیره کنید. توجه داشته باشید تاریخ انقضا در بسته بندی. $ $